医療検査室における汚染管理

医療検査室では、どんなに細心の注意を払っても、細胞培養の汚染のリスクは計り知れません。リスクが誤って計算されることは確かに前代未聞ではなく、汚染はしばしば文化の損失につながります. したがって、このブログでは、細胞株の汚染を体系的に検出して回避する方法に光を当てたいと思います。

すべての医療検査室は日々脅威にさらされています
サードパーティから購入したものを含む細胞培養における微生物汚染は、実験室では珍しくありません。実際、その逆です。実験室で培養された多くの細胞株は、マイコプラズマに感染しています。小さな真菌の胞子はどこにでもあり、空気中に広がる可能性があります。もちろん、無菌環境で作業する場合、ヒューマン エラーの余地があります。間違いを犯しやすいです。

細胞培養ラボにおける恐ろしいシナリオ - あらゆる種類の汚染:
微生物汚染 (バクテリア、マイコプラズマ、真菌、酵母など)
ウイルス汚染
タンパク質汚染 (プリオン)
化学汚染 (プラスチック、重金属などからの浸出物および抽出物
)他の細胞培養による汚染
汚染はどこから来るのですか？
1. 元の文化はどの程度「クリーン」ですか?

多くの場合、問題はソース マテリアルから始まります。培地の製造に可能な限りの努力を払っても、一部の材料は完全に無菌にすることはできません。したがって、滅菌フィルターからマイコプラズマが漏れるリスクが常にあります。プリオンは、121 °C での蒸気滅菌にも耐えることができます。

2. 作業中の実験室は本当に無菌環境ですか?

実験室汚染の主な原因の 1 つは人体です。たとえば、ラボの技術者が滅菌ベンチで複数の生産ラインを同時に処理することを回避すれば、交差汚染の多くの事例を回避できます。液体が適切に処理されない場合、ある培養物が別の培養物に急速に感染する可能性があります。

また、先を急ぐことは、つまらない仕事の大敵です。実験室のインキュベーターの扉は、むやみに開けてはいけませんし、もちろん長時間開けっぱなしにしてはいけません。どれだけ時間のプレッシャーがかかっていても、ラボの技術者は一度に 1 つの細胞株だけを処理する必要があります。作業台の下でディスポーザブル ピペットを開梱するときは、ねじを外した後にキャップを脇に置いておく必要があります。

3. 正しい実験装置を使用していますか?

もちろん、医療実験室で使用される機器でさえ、細胞培養にコンタミネーションを引き起こす可能性は十分にあります。したがって、次のことをお勧めします。

可塑剤を含まないプラスチック容器を使用
する インキュベーターに適した場所を選択する (洗面器の近くの場所は石鹸の汚染につながる可能性があります)
滅菌銅製のインキュベーター付属品を使用し てください
抗生物質を使用する場合は、抗生物質を含まない系統を時々繁殖させる必要があります。(これは、抗生物質が汚染を覆い隠し、感染が拡大する可能性があるためです。)
どの感染を追跡するためにどのような調査方法を使用できますか?
マイコプラズマ感染症の最も危険な点の 1 つは、長期間検出されないことが多いことです。原則として、汚染事象はさまざまな方法で制御および追跡できます。非常に高度な方法もあれば、それほど高度でない方法もあります。

経験豊富なラボ技術者は、顕微鏡で観察するだけで交差汚染が発生しているかどうかを判断できます。
細胞培養からすべての DNA を抽出すると、PCR 法を使用してそのマイコプラズマ DNA 含有量を検出できます。
ウイルス形質導入またはバイオアッセイを実施する研究所は、ウイルス汚染もチェックする必要があります。
新規治療薬を製造する研究所は、細菌、胞子、真菌、マイコプラズマ、HIV、HCV、および BSE のリスクが低いことを確認する必要があります。

汚染はどのように処理されるべきですか？
汚染のすべての事例を文書化し、等級付けする必要があります。少なくとも、汚染問題を覆い隠している医療研究所は、その評判を危うくしています。

もちろん、汚染の場合には特別な洗浄対策も講じる必要があります。真菌感染の場合は、実験室がアルコールベースの薬剤で定期的に消毒されていることを確認することをお勧めします。
原則として、定期的なスプレーまたはワイプ消毒アルコールベースの溶液を備え た科学的インキュベーター
の内部は、汚染を避けるのに役立ちます毎月の熱風滅菌は、多くの研究室で標準的な医療行為です
敏感な幹細胞の場合、感染した細胞株を抗生物質で処理できるのはまれなケースです.
ほとんどの場合、ソリューションには費用がかかります。結論として 、文化を破棄し、作業をゼロから開始する必要があります 。
特に高感度の幹細胞を扱い、抗生物質を使用しない医療研究所では、汚染を一貫して検出、検証、および処理できることが絶対に不可欠です。透過的な監視は不可欠です。汚染を隠蔽したり、拡散させたりすることは、危険を増大させるだけであり、不必要です。恒温インキュベーターは、常にプロセス ステップ全体で最も安全なコンポーネントである必要があります。サンプルが汚染されている場合、ほとんどの場合、これは冷却インキュベーター培養の上流または下流で発生します。